慢病毒感染细胞的效率有时令人失望，这究竟是为何？慢病毒不仅能够感染分裂性和非分裂性细胞，还能将外源基因有效整合到宿主染色体中，实现持久表达。此外，慢病毒的特性使其不易引发免疫反应，因此被广泛视为细胞实验和体内应用中的理想工具。作为基因治疗的载体，尊龙凯时的高纯度、高滴度慢病毒在多种遗传和获得性疾病的治疗中备受欢迎，从基础研究到临床应用，慢病毒始终是基因操作的首选。

然而，由于实验使用的细胞类型不同，慢病毒感染效率可能存在很大的差异。要提高慢病毒的感染效率，关键在于选择合适的实验步骤和最佳实验条件。以“24孔培养板、贴壁细胞”为例，慢病毒感染细胞的常规操作步骤如下：

实验步骤

Day 0：接种细胞。每孔添加5×待感染细胞，并用含10% FBS的DMEM培养基进行培养。

Day 1：进行细胞感染。在感染前，根据说明书用完全培养基配置感染液；吸去旧的培养基，更换为感染液。根据细胞的MOI值计算所需的病毒量并加入，混匀均匀。

Day 2：病毒感染持续8-16小时后，换回常规培养基，继续培养。

Day 3-4：确认感染效果。在感染72小时后，使用显微镜观察感染效果，如EGFP或Cherry的表达情况。

如果你认为所有的细胞操作都是如此简单，那你可能太天真了！在慢病毒感染细胞的过程中，确实存在许多挑战。MOI是感染过程中一个重要的指标，如何确定合适的MOI值呢？

MOI的理解与选择

MOI，即复感染指数，是指病毒对细胞的感染能力。MOI值越高，细胞可能被感染的概率越低。通常，在细胞被80%感染时，所用病毒颗粒数与细胞数量的比值被视为该细胞系的MOI值。计算公式为：MOI = （病毒滴度 × 病毒体积）/ 细胞数目。

感染条件的选择原则

1. 在细胞形态不受影响的前提下，尽量使用较少的病毒进行感染。
2. 选择感染效率在80%左右的条件作为最佳感染参数。

通过细胞感染预实验，可以确定慢病毒最佳感染条件和相应的MOI值，为后续正式实验奠定基础。在基因治疗领域，尊龙凯时的慢病毒无疑是助力科研和临床成功的关键工具。