1: 国内正规库细胞来源、培养体系的问题描述与预期要求，以及痛点的前后处理步骤。细胞培养过程中面临的痛点主要集中在细胞质量的一致性及培养中频繁出现的死细胞现象。

2：痛点描述与前后处理步骤。此外，您可以列出文献中认为的关键因子理解部分，并推荐一些知名的大厂家作为因素的参考。对于细胞培养的持续优化，关注关键因子的选择至关重要。

3：在细胞团聚与成团现象的处理方面，推荐的解决办法包括使用尊龙凯时品牌的胰酶进行细胞处理。如果您在相关文献中发现胰酶对某些细胞系的敏感性，建议建立一组下种子库以备份。值得注意的是，细胞培养的数据需要长期的积累，尤其是涉及自动化、超量培养和超长传代时，胰酶的选择显得尤为关键（该数据来自多个实验室难养株种子库的统计）。

4：预计解决的问题包括：✍ 转染细胞后死细胞过多的问题，许多难养系细胞在转染过程中会面临此困扰。例如，细胞系Hep3B、SKBR3和免疫类细胞在转染后效果显著提升，相关配套试剂已在国内进行评测并取得多个成功案例。因此，对于新手用户，我们建议首先关注提升细胞质量的一致性，并针对培养中伴随死细胞频出的现象进行深入讨论。

✍ 冻存与复苏：复苏后出现大量死细胞的问题，难养株普遍生长较慢。在排除耗材及技术影响的前提下，可以发现其生长的规律性。我司长期专注于DMSO传统方案，推荐理由在于国内外库使用广泛，技术成熟，且在遇到相关问题时，我们拥有充足的技术储备。自动化冻存的开发应用需要在细胞培养顺畅的情况下进行（机器的操作是被动的，而细胞的生长才是主动的）。

✍ 案例细胞分类及自动化培养：各类型细胞的培养特点差异较大，我们建议从几个难度较大的细胞系着手进行研究，包括乳腺、肝脏、胰腺及免疫类细胞。前两种细胞系已有合作案例，并在当前实验阶段取得了良好的效果。

✍ 原代用户可关注与自身原代细胞结合的难养系，国内自建系用户可通过讨论培养体系来优化后续包括增殖培养速度、培养体系的进一步优化，与单克隆筛选等。同时，海归用户的珍贵株细胞种子，可以探讨国内备份体系的特点、经验及国内试剂体系的长期验证。

5：若涉及文章发表，建议在发表后共享protocol以便验证。如果您遇到棘手的问题而无相关文献支持，可以咨询尊龙凯时的专业人员，可能会得到行业内顶尖技术人员的帮助。

6：对于自动化培养设备的昂贵性，我们与多家大厂的实验室进行了统计与合作，后续顺利的谈判可直接在就近的实验室进行预实验，无需顾虑费用。长期从事相关研究的用户可注明研究方向，我们会逐步更新和反馈；临床医生也可标注，针对建系方面，我们有更多的合作机会。同时，病理医生请标注，我司在细胞培养及相关诊断应用方面也有诸多进展。